IPTG CAS:367-93-1 നിർമ്മാതാവിന്റെ വില
ഐസോപ്രോപൈൽ β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) ലാക്ടോസിന്റെ ഒരു സിന്തറ്റിക് അനലോഗ് ആണ്, ഇത് തന്മാത്രാ ജീവശാസ്ത്ര ഗവേഷണത്തിലും ബയോടെക്നോളജി ആപ്ലിക്കേഷനുകളിലും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.IPTG പ്രാഥമികമായി ബാക്ടീരിയൽ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ ജീനുകളുടെ പ്രകടനത്തെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നതിന് ഉപയോഗിക്കുന്നു, അവിടെ ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ആരംഭിക്കുന്നതിനുള്ള ഒരു തന്മാത്ര ട്രിഗറായി ഇത് പ്രവർത്തിക്കുന്നു.
വളർച്ചാ മാധ്യമത്തിലേക്ക് ചേർക്കുമ്പോൾ, IPTG ബാക്ടീരിയകൾ ഏറ്റെടുക്കുകയും ലാക് റിപ്രസ്സർ പ്രോട്ടീനുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യും, ഇത് ലാക് ഓപ്പറോണിന്റെ പ്രവർത്തനത്തെ തടയുന്നതിൽ നിന്ന് തടയുന്നു.ലാക് ഓപ്പറോൺ എന്നത് ലാക്ടോസ് മെറ്റബോളിസത്തിൽ ഉൾപ്പെട്ടിരിക്കുന്ന ജീനുകളുടെ ഒരു കൂട്ടമാണ്, റിപ്രസർ പ്രോട്ടീൻ നീക്കം ചെയ്യുമ്പോൾ, ജീനുകൾ പ്രകടിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു.
ലാക് പ്രൊമോട്ടറിന്റെ ഘടനാപരമായി സജീവമായ പതിപ്പായ lacUV5 മ്യൂട്ടന്റ് പ്രൊമോട്ടറുമായി ചേർന്നാണ് IPTG ഉപയോഗിക്കുന്നത്.ഈ മ്യൂട്ടന്റ് പ്രൊമോട്ടറുമായി IPTG ഇൻഡക്ഷൻ സംയോജിപ്പിക്കുന്നതിലൂടെ, ഗവേഷകർക്ക് ഉയർന്ന തലത്തിലുള്ള ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ നേടാൻ കഴിയും.ശുദ്ധീകരണത്തിനോ മറ്റ് ഡൗൺസ്ട്രീം ആപ്ലിക്കേഷനുകൾക്കോ വലിയ അളവിൽ പ്രോട്ടീൻ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കാൻ ഇത് അനുവദിക്കുന്നു.
ജീൻ എക്‌സ്‌പ്രഷനു പുറമേ, നീല/വെളുത്ത സ്ക്രീനിംഗ് പരിശോധനകളിലും ഐപിടിജി പതിവായി ഉപയോഗിക്കാറുണ്ട്.ഈ സാങ്കേതികതയിൽ, lacZ ജീൻ സാധാരണയായി താൽപ്പര്യമുള്ള ഒരു ജീനുമായി സംയോജിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, ഈ ഫ്യൂഷൻ ജീൻ വിജയകരമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ബാക്ടീരിയകൾ സജീവമായ β- ഗാലക്‌ടോസിഡേസ് എൻസൈം ഉത്പാദിപ്പിക്കും.X-gal പോലുള്ള ക്രോമോജെനിക് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റിനൊപ്പം IPTG ചേർക്കുമ്പോൾ, β-galactosidase ന്റെ പ്രവർത്തനം കാരണം ഫ്യൂഷൻ ജീൻ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ബാക്ടീരിയകൾ നീലയായി മാറുന്നു.താൽപ്പര്യമുള്ള ജീനിനെ വിജയകരമായി സംയോജിപ്പിച്ച റീകോമ്പിനന്റ് സ്‌ട്രെയിനുകളെ തിരിച്ചറിയാനും തിരഞ്ഞെടുക്കാനും ഇത് അനുവദിക്കുന്നു.
ജീൻ എക്സ്പ്രഷന്റെ ഇൻഡക്ഷൻ: ബാക്ടീരിയൽ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ പ്രകടനത്തെ പ്രേരിപ്പിക്കാൻ IPTG സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഇത് സ്വാഭാവിക പ്രേരണയായ ലാക്ടോസിനെ അനുകരിക്കുകയും ലാക് റിപ്രസർ പ്രോട്ടീനുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ലാക് ഓപ്പറോണിനെ തടയുന്നതിൽ നിന്ന് തടയുകയും ചെയ്യുന്നു.ഇത് ആവശ്യമുള്ള ജീനുകളുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷനും എക്സ്പ്രഷനും അനുവദിക്കുന്നു.
പ്രോട്ടീൻ എക്സ്പ്രഷനും ശുദ്ധീകരണവും: ബയോകെമിക്കൽ പഠനങ്ങൾ, ചികിത്സാ ഉൽപ്പാദനം, അല്ലെങ്കിൽ ഘടനാപരമായ വിശകലനം എന്നിങ്ങനെ വിവിധ ആവശ്യങ്ങൾക്കായി വലിയ അളവിൽ റീകോമ്പിനന്റ് പ്രോട്ടീനുകൾ ഉൽപ്പാദിപ്പിക്കുന്നതിന് IPTG ഇൻഡക്ഷൻ പലപ്പോഴും ഉപയോഗിക്കുന്നു.ഉചിതമായ എക്സ്പ്രഷൻ വെക്റ്ററുകളും IPTG ഇൻഡക്ഷനും ഉപയോഗിക്കുന്നതിലൂടെ, ബാക്ടീരിയ ഹോസ്റ്റുകളിൽ ഉയർന്ന തലത്തിലുള്ള പ്രോട്ടീൻ ഉത്പാദനം ഗവേഷകർക്ക് നേടാനാകും.
ബ്ലൂ/വൈറ്റ് സ്ക്രീനിംഗ്: ബ്ലൂ/വൈറ്റ് സ്ക്രീനിംഗ് പരിശോധനകൾക്കായി ലാക്സെഡ് ജീനും എക്സ്-ഗാൽ പോലുള്ള ക്രോമോജെനിക് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റും ചേർന്ന് ഐപിടിജി പതിവായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.lacZ ജീൻ സാധാരണയായി താൽപ്പര്യമുള്ള ജീനുമായി സംയോജിപ്പിച്ചിരിക്കുന്നു, ഈ ഫ്യൂഷൻ ജീൻ വിജയകരമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ബാക്ടീരിയകൾ സജീവമായ β- ഗാലക്റ്റോസിഡേസ് എൻസൈം ഉത്പാദിപ്പിക്കും.ഐപിടിജിയും ക്രോമോജെനിക് സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റും ചേർക്കുമ്പോൾ, ഫ്യൂഷൻ ജീൻ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന റീകോമ്പിനന്റ് സ്‌ട്രെയിനുകൾ നീലയായി മാറുന്നു, ഇത് എളുപ്പത്തിൽ തിരിച്ചറിയാനും തിരഞ്ഞെടുക്കാനും അനുവദിക്കുന്നു.
ജീൻ നിയന്ത്രണത്തെക്കുറിച്ചുള്ള പഠനം: ജീനുകളുടെയും ഓപ്പറോണുകളുടെയും, പ്രത്യേകിച്ച് ലാക് ഒപെറോണിന്റെ നിയന്ത്രണത്തെക്കുറിച്ച് പഠിക്കാൻ ഗവേഷണത്തിൽ IPTG ഇൻഡക്ഷൻ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.IPTG യുടെ സാന്ദ്രത കൈകാര്യം ചെയ്യുന്നതിലൂടെയും ലാക് ഓപ്പറോൺ ഘടകങ്ങളുടെ പ്രകടനത്തെ നിരീക്ഷിക്കുന്നതിലൂടെയും, ഗവേഷകർക്ക് ജീൻ നിയന്ത്രണത്തിന്റെ സംവിധാനങ്ങളും വിവിധ ഘടകങ്ങളുടെ അല്ലെങ്കിൽ മ്യൂട്ടേഷനുകളുടെ പങ്കും അന്വേഷിക്കാൻ കഴിയും.
ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ സിസ്റ്റങ്ങൾ: T7 പ്രൊമോട്ടർ അധിഷ്ഠിത സിസ്റ്റങ്ങൾ പോലെയുള്ള നിരവധി ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ IPTG ഒരു നിർണായക ഘടകമാണ്.ഈ സിസ്റ്റങ്ങളിൽ, ലാക് പ്രൊമോട്ടർ പലപ്പോഴും T7 RNA പോളിമറേസിന്റെ എക്സ്പ്രഷൻ ഡ്രൈവ് ചെയ്യാൻ ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് T7 പ്രൊമോട്ടർ സീക്വൻസുകളുടെ നിയന്ത്രണത്തിലുള്ള ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളെ ട്രാൻസ്ക്രൈബ് ചെയ്യുന്നു.T7 RNA പോളിമറേസിന്റെ എക്സ്പ്രഷൻ പ്രേരിപ്പിക്കാൻ IPTG ഉപയോഗിക്കുന്നു, ഇത് ടാർഗെറ്റ് ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ സജീവമാക്കുന്നതിലേക്ക് നയിക്കുന്നു.
| രചന | C9H18O5S |
| വിലയിരുത്തുക | 99% |
| രൂപഭാവം | വെളുത്ത പൊടി |
| CAS നമ്പർ. | 367-93-1 |
| പാക്കിംഗ് | ചെറുതും ബൾക്കും |
| ഷെൽഫ് ലൈഫ് | 2 വർഷം |
| സംഭരണം | തണുത്തതും വരണ്ടതുമായ സ്ഥലത്ത് സൂക്ഷിക്കുക |
| സർട്ടിഫിക്കേഷൻ | ഐഎസ്ഒ. |
