4-നൈട്രോഫെനൈൽ ബീറ്റ-ഡി-ഗാലക്‌ടോപൈറനോസൈഡ് CAS:200422-18-0

പ്രഭാവം: ONPG എന്നത് β-galactosidase എന്ന എൻസൈമിന്റെ സാന്നിധ്യവും പ്രവർത്തനവും കണ്ടുപിടിക്കാൻ പ്രത്യേകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന ഒരു അടിവസ്ത്രമാണ്.β-ഗാലക്‌ടോസിഡേസ് എൻസൈം സജീവമായിരിക്കുമ്പോൾ, അത് ഒഎൻപിജിയെ രണ്ട് ഉൽപ്പന്നങ്ങളായി വിഭജിക്കുന്നു: ഒ-നൈട്രോഫെനോൾ, ഗാലക്‌ടോസ് ഡെറിവേറ്റീവ്.ഒ-നൈട്രോഫെനോളിന്റെ വിമോചനം ഒരു മഞ്ഞ നിറം മാറ്റത്തിന് കാരണമാകുന്നു, ഇത് ഒരു സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമീറ്റർ ഉപയോഗിച്ച് അളക്കാൻ കഴിയും.

ആപ്ലിക്കേഷൻ: മോളിക്യുലാർ ബയോളജിയിലും ബയോകെമിസ്ട്രി ഗവേഷണത്തിലും ഒഎൻപിജിക്ക് നിരവധി ആപ്ലിക്കേഷനുകൾ ഉണ്ട്:

β-galactosidase പ്രവർത്തനത്തിന്റെ നിർണ്ണയം: ONPG സാധാരണയായി β-galactosidase എൻസൈമിന്റെ പ്രവർത്തനം അളക്കുന്നതിനും അളക്കുന്നതിനും ഉപയോഗിക്കുന്നു.എൻസൈം പ്രവർത്തനത്തിന് നേരിട്ട് ആനുപാതികമായ ഒ-നൈട്രോഫെനോൾ രൂപീകരണ നിരക്ക് സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രിക് ആയി അളക്കാൻ കഴിയും.

ജീൻ എക്‌സ്‌പ്രഷനും നിയന്ത്രണവും: ജീൻ എക്‌സ്‌പ്രഷനും റെഗുലേഷൻ പഠനങ്ങളുമായി ബന്ധപ്പെട്ട പരീക്ഷണങ്ങളിൽ ഒഎൻപിജി പലപ്പോഴും ഉപയോഗിക്കാറുണ്ട്.പ്രത്യേക പ്രൊമോട്ടർമാരുടെ നിയന്ത്രണത്തിലുള്ള ജീനുകളുടെ പ്രകടനത്തെക്കുറിച്ച് പഠിക്കാൻ സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന lacZ ഫ്യൂഷൻ സിസ്റ്റം പോലെയുള്ള ഫ്യൂഷൻ പ്രോട്ടീൻ പരിശോധനകളിൽ ഇത് പതിവായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.ONPG ഉപയോഗിച്ച് അളക്കുന്ന ബീറ്റാ-ഗാലക്‌ടോസിഡേസ് പ്രവർത്തനം ജീൻ എക്‌സ്‌പ്രഷന്റെ നിലവാരത്തെക്കുറിച്ചുള്ള ഉൾക്കാഴ്ചകൾ നൽകുന്നു.

β-galactosidase പ്രവർത്തനത്തിനുള്ള സ്ക്രീനിംഗ്: β-galactosidase എൻകോഡ് ചെയ്യുന്ന LacZ ജീനിന്റെ സാന്നിധ്യവും പ്രവർത്തനവും തിരിച്ചറിയാൻ ONPG പുനഃസംയോജിത DNA സാങ്കേതികവിദ്യയിൽ കളർമെട്രിക് സ്ക്രീനിംഗ് രീതിയായി ഉപയോഗിക്കാം.താൽപ്പര്യമുള്ള ജീൻ അടങ്ങിയ ക്ലോണുകളെ തിരിച്ചറിയാൻ ഈ സ്ക്രീനിംഗ് രീതി സഹായിക്കുന്നു.

എൻസൈം ചലനാത്മക പഠനങ്ങൾ: β-ഗാലക്റ്റോസിഡേസ് എൻസൈമിന്റെ ചലനാത്മകത പഠിക്കുന്നതിനും ONPG ഉപയോഗപ്രദമാണ്.വിവിധ സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് സാന്ദ്രതകളിലെ എൻസൈം-സബ്‌സ്‌ട്രേറ്റ് പ്രതിപ്രവർത്തനത്തിന്റെ നിരക്ക് അളക്കുന്നതിലൂടെ, മൈക്കിലിസ്-മെന്റെൻ കോൺസ്റ്റന്റ്‌സ് (കിലോമീറ്റർ), പരമാവധി പ്രതിപ്രവർത്തന നിരക്കുകൾ (വിമാക്‌സ്) തുടങ്ങിയ ഗതിവിഗതികൾ നിർണ്ണയിക്കാൻ കഴിയും.