നമുക്ക് ചുറ്റും പാടാത്ത നിരവധി നായകന്മാരുണ്ട്, അവർ സാധാരണക്കാരാണെന്ന് തോന്നുന്നു, പക്ഷേ വാസ്തവത്തിൽ അവർ നിശബ്ദമായി നമുക്ക് വളരെയധികം സംഭാവന നൽകുന്നു. മോളിക്യുലാർ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക്സ് വ്യവസായത്തിലെ "പാടാത്ത നായകൻ" പ്രോട്ടീനേസ് കെ ആണ്, എന്നിരുന്നാലും വ്യവസായത്തിലെ "വലുതും ശക്തവുമായ" പ്രോട്ടീനേസ് കെ വളരെ കുറവാണ്, അതിനാൽ നമ്മൾ വളരെക്കാലമായി അതിന്റെ പ്രാധാന്യം അവഗണിച്ചു. പുതിയ ക്രൗൺ പകർച്ചവ്യാധി പൊട്ടിപ്പുറപ്പെട്ടതോടെ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ആവശ്യം കുതിച്ചുയർന്നു, സ്വദേശത്തും വിദേശത്തുമുള്ള വിതരണം ഉപഭോഗത്തേക്കാൾ വളരെ പിന്നിലാണ്, പ്രോട്ടീനേസ് കെ വളരെ പ്രധാനമാണെന്ന് എല്ലാവരും പെട്ടെന്ന് മനസ്സിലാക്കി.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഉപയോഗം എന്താണ്?
പ്രോട്ടീനേസ് കെ എന്നത് പ്രോട്ടിയോലൈറ്റിക് എൻസൈം പ്രവർത്തനമുള്ള ഒരു സെറിൻ പ്രോട്ടീസാണ്, കൂടാതെ വിശാലമായ പരിതസ്ഥിതികളിൽ (pH (4-12.5), ഉയർന്ന ഉപ്പ് ബഫർ, 70°C ഉയർന്ന താപനില മുതലായവ) പ്രവർത്തനം നിലനിർത്താൻ കഴിയും. കൂടാതെ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ പ്രവർത്തനത്തെ എസ്ഡിഎസ്, യൂറിയ, ഇഡിടിഎ, ഗ്വാനിഡിൻ ഹൈഡ്രോക്ലോറൈഡ്, ഗ്വാനിഡിൻ ഐസോത്തിയോസയനേറ്റ് മുതലായവ തടയുന്നില്ല, കൂടാതെ ഒരു നിശ്ചിത അളവിലുള്ള ഡിറ്റർജന്റും പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിക്കും. വൈദ്യചികിത്സയിൽ (വൈറസും സൂക്ഷ്മജീവികളുടെ അണുനശീകരണവും), ഭക്ഷണം (മാംസം ടെൻഡറൈസേഷൻ), തുകൽ (മുടി മൃദുവാക്കൽ), വൈൻ നിർമ്മാണം (മദ്യം വ്യക്തമാക്കൽ), അമിനോ ആസിഡ് തയ്യാറാക്കൽ (ഡീഗ്രേഡ് ചെയ്ത തൂവലുകൾ), ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ, ഇൻ സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ മുതലായവയിൽ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ ആപ്ലിക്കേഷനുകളുണ്ട്. ഏറ്റവും സാധാരണയായി ഉപയോഗിക്കുന്ന പ്രയോഗം ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ ആണ്.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ, സാമ്പിളിലെ എല്ലാത്തരം പ്രോട്ടീനുകളെയും എൻസൈമോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളുമായി ദൃഢമായി ബന്ധിപ്പിച്ചിരിക്കുന്ന ഹിസ്റ്റോണുകൾ ഉൾപ്പെടെ, അങ്ങനെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകൾ സാമ്പിളിൽ നിന്ന് പുറത്തുവിടാനും സത്തിൽ വിടാനും കഴിയും, ഇത് വേർതിരിച്ചെടുക്കലിന്റെയും ശുദ്ധീകരണത്തിന്റെയും അടുത്ത ഘട്ടത്തെ സുഗമമാക്കുന്നു. വൈറൽ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തുന്നതിൽ, വൈറസ് സാമ്പിൾ ലായനിയിലെ പ്രധാന ഘടകങ്ങളിലൊന്നാണ് പ്രോട്ടീനേസ് കെ. പ്രോട്ടീനേസ് കെ വൈറസിന്റെ കോട്ട് പ്രോട്ടീൻ പൊട്ടിക്കുകയും നിർജ്ജീവമാക്കുകയും ചെയ്യും, ഇത് ഗതാഗത, കണ്ടെത്തൽ ഘട്ടത്തിൽ സുരക്ഷിതമാണ്; കൂടാതെ, പ്രോട്ടീനേസ് കെയ്ക്ക് ഡീഗ്രേഡ് ചെയ്യാനും കഴിയും, ആർഎൻഎ വൈറൽ ആർഎൻഎയുടെ ഡീഗ്രേഡേഷൻ തടയുകയും ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തൽ സുഗമമാക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഒറ്റരാത്രികൊണ്ടുള്ള പ്രശസ്തി
ശാസ്ത്ര ഗവേഷണ മേഖലയിലായാലും IVD മേഖലയിലായാലും, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ ഏറ്റവും അടിസ്ഥാന പരീക്ഷണമാണ്, അതിനാൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ എല്ലായ്പ്പോഴും വളരെ പ്രധാനപ്പെട്ട ഒരു അസ്തിത്വമാണ്. എന്നിരുന്നാലും, മുൻകാലങ്ങളിൽ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ അതിന്റെ പങ്കിനേക്കാൾ വളരെ കുറച്ച് മാത്രമേ അറിയപ്പെട്ടിരുന്നുള്ളൂ. പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ വിതരണ-ആവശ്യകത ബന്ധം വളരെ സ്ഥിരതയുള്ളതായിരുന്നു എന്നതാണ് ഇതിന്റെ ഒരു വലിയ ഭാഗം. പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ വിതരണം ഒരു പ്രശ്നമാകുമെന്ന് കുറച്ച് ആളുകൾ മാത്രമേ കരുതുന്നുള്ളൂ.
പുതിയ ക്രൗൺ പകർച്ചവ്യാധി പൊട്ടിപ്പുറപ്പെട്ടതോടെ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് പരിശോധനയ്ക്കുള്ള ആവശ്യം വർദ്ധിച്ചു. 2020 ജൂൺ അവസാനത്തോടെ, ചൈന ഏകദേശം 90 ദശലക്ഷം പുതിയ ക്രൗൺ ടെസ്റ്റുകൾ പൂർത്തിയാക്കി, ആഗോളതലത്തിൽ ഈ സംഖ്യ കൂടുതൽ ആശങ്കാജനകമാണ്. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷൻ പരീക്ഷണങ്ങളിൽ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ പ്രവർത്തന സാന്ദ്രത ഏകദേശം 50-200 μg/mL ആണ്. സാധാരണയായി, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡിന്റെ ഒരു സാമ്പിൾ വേർതിരിച്ചെടുക്കാൻ ഏകദേശം 100 μg പ്രോട്ടീനേസ് കെ ആവശ്യമാണ്. യഥാർത്ഥ ഉപയോഗത്തിൽ, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് എക്സ്ട്രാക്ഷന്റെ കാര്യക്ഷമത വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിന്, പലപ്പോഴും പ്രോട്ടീനേസ് കെ വർദ്ധിച്ച അളവിൽ ഉപയോഗിക്കും. പുതിയ കൊറോണ വൈറസിന്റെ ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് കണ്ടെത്തൽ വലിയ അളവിൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ ഡിമാൻഡ് കൊണ്ടുവന്നു. പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ യഥാർത്ഥ വിതരണ-ഡിമാൻഡ് ബാലൻസ് പെട്ടെന്ന് തകർന്നു, ഒറ്റരാത്രികൊണ്ട് പ്രോട്ടീനേസ് കെ ഒരു പ്രധാന പകർച്ചവ്യാധി പ്രതിരോധ വസ്തുവായി മാറി.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഉത്പാദനത്തിലെ ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ
പകർച്ചവ്യാധിയുടെ വികാസത്തോടെ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ പ്രധാന മൂല്യം ആളുകൾ വിലമതിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിലും, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ അമിതമായ കുറഞ്ഞ അളവ് കാരണം, കുറച്ച് ആഭ്യന്തര കമ്പനികൾ മാത്രമേ പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഉൽപാദനത്തിൽ ഏർപ്പെട്ടിട്ടുള്ളൂ എന്നത് ലജ്ജാകരമാണ്. ആളുകൾ പ്രോട്ടീനേസ് കെ ഉൽപ്പാദനം സ്ഥാപിക്കാൻ ആഗ്രഹിക്കുമ്പോൾ, ഉൽപ്പാദന പ്രക്രിയയിൽ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ വളരെ സവിശേഷമായ ഒരു പ്രോട്ടീനാണെന്ന് കണ്ടെത്തി. കുറഞ്ഞ സമയത്തിനുള്ളിൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഉൽപാദന ശേഷി വികസിപ്പിക്കുന്നത് വളരെ വെല്ലുവിളി നിറഞ്ഞതാണ്.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ വലിയ തോതിലുള്ള ഉത്പാദനം ഇനിപ്പറയുന്ന ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ നേരിടുന്നു:
1. താഴ്ന്ന എക്സ്പ്രഷൻ
പ്രോട്ടീനേസ് കെ മിക്ക പ്രോട്ടീനുകളെയും പ്രത്യേകമായി വിഘടിപ്പിക്കുകയും എക്സ്പ്രഷൻ ഹോസ്റ്റ് സെല്ലിന് ഗുരുതരമായ വിഷബാധയുണ്ടാക്കുകയും ചെയ്യും. അതിനാൽ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവൽ സാധാരണയായി വളരെ കുറവാണ്. പ്രോട്ടീനേസ് കെ യെ വളരെയധികം പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എക്സ്പ്രഷൻ സിസ്റ്റങ്ങളുടെയും സ്ട്രെയിനുകളുടെയും സ്ക്രീനിംഗിന് സാധാരണയായി ദൈർഘ്യമേറിയ ഒരു ചക്രം ആവശ്യമാണ്.
2. പിഗ്മെന്റുകളുടെയും ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളുടെയും അവശിഷ്ടങ്ങൾ
വലിയ തോതിലുള്ള അഴുകൽ പ്രക്രിയയിൽ വലിയ അളവിൽ പിഗ്മെന്റും ഹോസ്റ്റ് ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളും പ്രത്യക്ഷപ്പെടുന്നു. ലളിതമായ ഒരു ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയയിലൂടെ ഈ മാലിന്യങ്ങൾ നീക്കം ചെയ്യുന്നത് ബുദ്ധിമുട്ടാണ്, കൂടാതെ സങ്കീർണ്ണമായ ശുദ്ധീകരണം ചെലവ് വർദ്ധിപ്പിക്കുകയും വീണ്ടെടുക്കൽ നിരക്ക് കുറയ്ക്കുകയും ചെയ്യുന്നു.
3. അസ്ഥിരത
പ്രോട്ടീനേസ് കെ വേണ്ടത്ര സ്ഥിരതയുള്ളതല്ല, അതിന് സ്വയം എൻസൈമോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും, കൂടാതെ ഒരു സംരക്ഷക ഏജന്റ് ഇല്ലാതെ 37°C-ൽ ദീർഘനേരം സ്ഥിരമായി സൂക്ഷിക്കാൻ പ്രയാസമാണ്.
4. എളുപ്പത്തിൽ അവക്ഷിപ്തമാകാം
പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഫ്രീസ്-ഡ്രൈഡ് പൗഡർ തയ്യാറാക്കുമ്പോൾ, ഫ്രീസ്-ഡ്രൈഡ് പൗഡറിൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഖര അളവ് കൂടുതലാണെന്ന് ഉറപ്പാക്കാൻ, ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ ഒരു ഫ്രീസ്-ഡ്രൈഡ് പ്രൊട്ടക്റ്റീവ് ഏജന്റ് ചേർക്കേണ്ടത് ആവശ്യമാണ്, എന്നാൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ സാന്ദ്രത 20mg/mL ഉം അതിൽ കൂടുതലും എത്തുമ്പോൾ, അത് എളുപ്പമാണ്. അഗ്രഗേഷൻ ഒരു അവശിഷ്ടം ഉണ്ടാക്കുന്നു, ഇത് ഉയർന്ന ഖര ഉള്ളടക്കമുള്ള പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഫ്രീസ്-ഡ്രൈയിംഗിന് വലിയ ബുദ്ധിമുട്ടുകൾ സൃഷ്ടിക്കുന്നു.
5. വലിയ നിക്ഷേപം
പ്രോട്ടീനേസ് കെയ്ക്ക് ശക്തമായ പ്രോട്ടീസ് പ്രവർത്തനം ഉണ്ട്, കൂടാതെ ലബോറട്ടറിയിൽ മറ്റ് പ്രോട്ടീസുകളെ ഹൈഡ്രോലൈസ് ചെയ്യാൻ കഴിയും. അതിനാൽ, ഗവേഷണത്തിനും വികസനത്തിനും ഉൽപ്പാദനത്തിനുമായി പ്രോട്ടീനേസ് കെക്ക് പ്രത്യേക ഉൽപ്പാദന മേഖലകൾ, ഉപകരണങ്ങൾ, ഉദ്യോഗസ്ഥർ എന്നിവ ആവശ്യമാണ്.
XD ബയോകെമിന്റെ പ്രോട്ടീനേസ് കെ ലായനി
XD BIOCHEM-ന് പക്വമായ പ്രോട്ടീൻ എക്സ്പ്രഷനും ശുദ്ധീകരണ പ്ലാറ്റ്ഫോമും ഉണ്ട്, കൂടാതെ റീകോമ്പിനന്റ് പ്രോട്ടീനുകളുടെ എക്സ്പ്രഷനിലും ശുദ്ധീകരണത്തിലും ഉൽപാദന പ്രക്രിയകളുടെ ഒപ്റ്റിമൈസേഷനിലും സമ്പന്നമായ അനുഭവമുണ്ട്. ഒരു ഗവേഷണ വികസന സംഘത്തിന്റെ ദ്രുത രൂപീകരണത്തിലൂടെ, പ്രോട്ടീനേസ് K യുടെ വലിയ തോതിലുള്ള ഉൽപാദന പ്രക്രിയയെ മറികടക്കാൻ കഴിഞ്ഞു. ഫ്രീസ്-ഡ്രൈഡ് പൊടിയുടെ പ്രതിമാസ ഉൽപാദനം 30 KG-യിൽ കൂടുതലാണ്. ഉൽപ്പന്നത്തിന് സ്ഥിരതയുള്ള പ്രകടനവും ഉയർന്ന എൻസൈം നിർദ്ദിഷ്ട പ്രവർത്തനവും ഹോസ്റ്റ് സൈറ്റോക്രോം, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങളും ഇല്ല. XD BIOCHEM-നെ ബന്ധപ്പെടാൻ സ്വാഗതം ഒരു ട്രയൽ പാക്കേജ് നേടുക (ഇ-മെയിൽ:sales@xdbiochem.comഫോൺ: +86 513 81163739).
XD BIOCHEM-ന്റെ സാങ്കേതിക പരിഹാരങ്ങളിൽ ഇവ ഉൾപ്പെടുന്നു
മൾട്ടി-കോപ്പി പ്ലാസ്മിഡ് ഇന്റഗ്രേഷൻ ഉപയോഗിച്ച്, 8g/L എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലുള്ള ഉയർന്ന എക്സ്പ്രഷൻ സ്ട്രെയിനുകൾ തിരഞ്ഞെടുക്കുന്നു, ഇത് പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ കുറഞ്ഞ എക്സ്പ്രഷൻ ലെവലിന്റെ പ്രശ്നത്തെ മറികടക്കുന്നു.
ഒരു മൾട്ടി-സ്റ്റെപ്പ് ശുദ്ധീകരണ പ്രക്രിയ സ്ഥാപിച്ചതിലൂടെ, പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഹോസ്റ്റ് സൈറ്റോക്രോം, ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് അവശിഷ്ടങ്ങൾ സ്റ്റാൻഡേർഡ് മൂല്യത്തിന് താഴെയായി വിജയകരമായി നീക്കം ചെയ്യാൻ കഴിഞ്ഞു.
പ്രൊട്ടക്റ്റീവ് ബഫർ ഫോർമുലേഷനുകളുടെ ഉയർന്ന-ത്രൂപുട്ട് സ്ക്രീനിംഗിലൂടെ, 37°C-ൽ പ്രോട്ടീനേസ് കെ സ്ഥിരമായി സംഭരിക്കാൻ കഴിയുന്ന ഒരു ബഫർ തിരഞ്ഞെടുത്തു.
പ്രോട്ടീനേസ് കെ ഉയർന്ന സാന്ദ്രതയിൽ എളുപ്പത്തിൽ കൂട്ടിച്ചേർക്കാനും അവക്ഷിപ്തമാക്കാനും കഴിയുമെന്ന പ്രശ്നത്തെ സ്ക്രീനിംഗ് ബഫറുകൾ മറികടക്കുന്നു, കൂടാതെ പ്രോട്ടീനേസ് കെ യുടെ ഉയർന്ന ഖര ഉള്ളടക്കമുള്ള ഫ്രീസ്-ഡ്രൈയിംഗിന് അടിത്തറയിടുന്നു.
XD ബയോകെം പ്രോട്ടീനേസ് കെ സാമ്പിൾ
XD BIOCHEM പ്രോട്ടീനേസ് K സ്ഥിരത പരിശോധന: മുറിയിലെ താപനിലയിൽ 80 ദിവസത്തിനുശേഷം പ്രവർത്തനത്തിൽ കാര്യമായ മാറ്റമൊന്നും ഉണ്ടാകില്ല.
XD BIOCHEM പ്രോട്ടീനേസ് K സ്ഥിരത പരിശോധന: മുറിയിലെ താപനിലയിൽ 80 ദിവസത്തിനുശേഷം പ്രവർത്തനത്തിൽ കാര്യമായ മാറ്റമൊന്നും ഉണ്ടാകില്ല.
XD BIOCHEM പ്രോട്ടീനേസ് K യുടെയും മത്സര ഉൽപ്പന്നങ്ങളുടെയും ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ ഫലത്തിന്റെ താരതമ്യം. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡ് വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ പ്രക്രിയയിൽ, യഥാക്രമം XD BIOCHEM ഉം മത്സര പ്രോട്ടീനേസ് K ഉം ഉപയോഗിക്കുന്നു. XD BIOCHEM പ്രോട്ടീനേസ് K യുടെ വേർതിരിച്ചെടുക്കൽ കാര്യക്ഷമത കൂടുതലാണ്, ലക്ഷ്യ ജീനിന്റെ Ct മൂല്യം കുറവാണ്.
പോസ്റ്റ് സമയം: ഡിസംബർ-31-2021